Plateforme 3: Imagerie Cellulaire

Cellular imaging

Responsables: Claude Gravel et Yves De Koninck

Coordonnatrice de la Plate-forme d'outils moléculaires: Marie-Ève Paquet (Marie-Eve.Paquet@bcm.ulaval.ca)

Lieu: Centre de Neurophotonique au Centre de Recherche de l'Institut universitaire en santé mentale de Québec.

Lien: Plateforme d'outils moléculaires du centre de Neurophotonique

Animaux génétiquement modifiés et vecteurs viraux pour marqueurs fluorescents et photosensibles

La Plate-forme d'Outils Moléculaires (POM) au centre de Neurophotonique génère des outils moléculaires pour l’imagerie optique du système nerveux. Ces outils consistent en des fragments d’ADN codant pour des marqueurs et protéines fluorescents, et des sondes sensibles à la lumière.

Plusieurs techniques peuvent être utilisées pour introduire ces fragments d’ADN dans des cellules ou tissus en culture, ou des animaux vivants - la POM a une expertise particulière dans l'utilisation de vecteurs viraux. Un bon nombre de marqueurs fluorescents peuvent aussi être utilisés pour générer des animaux génétiquement modifiés.

Les outils moléculaires d'optogénétique de Karl Deisseroth, de Stanford University, sont aussi disponibles à la POM.

Les domaines d’expertise de la POM incluent:

  • les vecteurs viraux
  • les constructions moléculaires
  • les marqueurs à expression conditionnelle
  • les animaux transgéniques (BAC ou autres)
  • les souris KO/KI
  • les outils moléculaires (ADN) fluorescents utiles pour:
    1. l'enregistrement d’activité neuronale
    2. l'imagerie des tissus
    3. les mesures de concentrations ioniques
    4. l'activation et l'inhibition de neurones par la lumière (optogénétique)
    5. le ciblage cellulaire ou intra-cellulaire

Outils disponibles pour les membres du RQRD

Informations au sujet des fluorophores:

Un fluorophore est une molécule fluorescente qui émet de la lumière de longueur d'onde λe (pic d'émission) suite à l'absorption de lumière d'une longueur d'onde λa (pic d'absorption). Le document suivant fournit plus d'information au sujet des fluorophores disponibles à la POM:

Télécharger le tableau des fluorophores. L'explication de toutes les variables du document se trouvent sur la seconde page, ou en cliquant sur les en-têtes de colonnes.

Information sur les différents vecteurs viraux produits par la Plate-forme d'Outils Moléculaires

L’utilisation d’outils viraux pour livrer des gènes aux neurones est relativement répandue. Cette technique qui permet entre autres de transférer des marqueurs fluorescents dans des neurones de façon plus ou moins spécifique peut être très efficace. Cependant, les différents virus disponibles ont des caractéristiques différentes et ces données doivent être considérées lors du choix d'utilisation d’un virus plutôt qu’un autre. Voici quelques aspects de chaque virus qui peuvent influencer ce choix: taille de l’insert (gène d’intérêt), cellules à cibler, temps entre l’infection et l’expression du gène d’intérêt, persistance de l’expression.

Télécharger le document d'information sur les virus disponibles à la POM.

Une fois à l'intérieur des cellules, certains marqueurs peuvent être transportés dans les neurones, tel qu'illustré dans le diagramme à droite.

Outils QPRN

La POM maintient une liste d'outils moléculaires développés pour des membres du RQRD qui sont accessibles aux autres membres du réseau. Un nom d'usager et un mot de passe sont nécessaires pour y accéder. Pour obtenir vos codes d'accès, veuillez contacter la coordonnatrice de la POM, Marie-Ève Paquet par courriel. Vous pourrez ensuite utiliser le lien qui suit pour accéder à la liste des outils disponibles.

Accès protégé aux outils QPRN

Visitez le site de la Plateforme d'Outils Moléculaires pour plus d'informations.